다시 뛰는 공정도시 서울!

문서번호 종보전연구실-8348 결재일자 2021. 12. 31. 공개여부 부분공개(6) 방침번호 시 민 주무관 종보전연구실장 김민수 12/31 여용구 협 조 주무관 손장원 주무관 곽정연 동물원 사육동물 장내 세균 분석 및 항생제 내성 연구 계획 서울대공원 (종보전연구실) 동물원 사육동물 장내 세균 분석 및 항생제 내성 연구 계획 동물원 내 사육 개체에 대한 장내 세균(Enterococcus) 종별 분포 및 항생제 내성을 알아보고자 아래와 같이 연구 계획을 수립하여 동물원 공중보건 향상에 기여하고자 함. Ⅰ 현황 및 필요성 ？ One health 공중보건 개념이 도입되어 도축장, 식육, 반려동물 등 여려분야에서 항생제 내성 연구가 중요시 되고 있고 활발히 연구되고 있으나, ？ 야생동물 분야, 특히 동물원 내 사육동물의 장내세균의 항생제 내성검사는 국내에서 실시된 적이 없는바, 공종보건의 잠재적 위험이 될수 있는 항생제 내성에 대한 연구가 반드시 필요한 실정 ？ 이에 동물원 사육동물 중 일부에 대하여 장내세균중 Enterococcus spp. 종 분포 및 항생제 지표세균종 중 하나인 Enterococcus faecalis와 Enterococcus faecium의 항생제 내성 검사를 통하여 항생제 감수성 연구를 시행 Ⅱ 재료 및 방법 ？ 시료수집 - 수집방법 : 진료팀과 함께 이환동물 및 건강검진 중인 동물에 대하여 멸균수송스왑봉으로 항문스왑을 통하여 샘플 수집 - 기 간 : 2022.1월~6월(월별 약 10건 이상) - 시료수 : 약 50~100건 - 비 고 : 종 무관, 개체번호 확인 및 건강개체와 이환개체 구분 요망 ？ 세균배양 - Chrom agar 선택배지를 이용하여 enterococcus spp.만 분리 배양 - 분리된 enterococcus 세균을 gram stain 후 VITEK II으로 동정 ？ 종 분리 확정 - PCR primer 제작 의뢰 및 자체 PCR 검사를 실시하여 E.faecalis, E.faecium, E.casseliflavus, E.hirae, E.mundtii 중 종동정 - PCR로 분리된 세균 정제 후 Sanger Sequencing 분석 의뢰 후 Blast를 통하여 시퀀스 비교하여 종 분리 확정 < Reference : Resistance to antimicrobial agents among enterococci isolated from fecal samples of wild marine species in the southern coast of Brazil> ？ 항생제 감수성 검사 - Enterococcus spp. 중 항생제 감수성 지표세균인 E.faecalis, E.faecium 2종에 대하여 CLSI 기준 항생제 감수성 검사 실시 - 항생제 subclass 12~16종 항생제 내성 검사 실시 - Disk diffusion 방법으로 검사 실시 - Vancomycin은 별도 E-test검사 실시 - Vancomycin 내성 isolates에 대하여 vanA, vanB, vanM gene 검사 의뢰 - 내성균 종별 PFGE(Pulsed field gel electrophoresis) 검사 의뢰하여 근연관계 추적 정리 Ⅲ 소 요 예 산 : □ 소요금액 : 금 20,000천원 ○ 키트 구입비용 : 박테리아 DNA추출 키트, PCR 정제 키트, E-test 키트 등 : 10,000천원 - 서울대공원 총무과, 공원이용시민 만족도 향상, 동물사 관리기능 및 야생동물 종보전, 야생동물 종보전연구, 재료비. ○ 검사 의뢰 비용 : PCR primer제작 비용, PFGE검사 의뢰비용, Vancomycin gene 검사 의뢰 비용, 시퀀스 분석비용 등 : 10,000천원 - 서울대공원 총무과, 공원이용시민 만족도 향상, 동물사 관리기능 및 야생동물 종보전, 야생동물 종보전연구, 사무관리비. Ⅳ 향 후 계 획 ○ 2022.1월 : 실험 키트, 시약 등 준비 ○ 2022.2~6월 : 샘플 수집 및 자체 실험, 외부 검사 의뢰 ○ 2022.7~11월 : 자료 분석 및 결과 발표 준비 ○ 2022.12월 : 결과 투고 Ⅴ 기 대 효 과 ○ 동물원 내 항생제 감수성 결과에 따른 진료에 참고 자료 활용 ○ 국내 최초 동물원 내 사육동물에 대한 연구 및 공중보건 연구 의의. ○ 항생제 내성 결과에 따른 후속 연구. 끝.

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본청

종보전연구실-8348

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