서울特別市 保健環境硏究院報 第50號	(2014)

Report of S.I.H.E., 50:148~156	(2014)

생약제제 중 벤조피렌 실태조사

의약품분석팀

김유경․이명숙․손여준․김은희․정희정․김정곤․김정헌

Monitoring of Benzo[a]pyrene in Herbal Medicinal Products

Pharmaceutical Analysis Team

Yoo-kyung Kim, Myung-sook Lee, Yeo-joon Son, Eun-hee Kim, Hee-jeong Jeong, Jeong-gon Kim and Jung-hun Kim

Abstract

This study was performed to investigate the contamination levels of benzo[a]pyrene in 21 granule and 8 pill samples of herbal medicinal products. Benzo[a]pyrene levels were analyzed using HPLC-FLD, and the results were as follows: In the case of pills, less than 1.00 ㎍/㎏ was observed in 2 samples, between 1.00 and 5.00 ㎍/㎏ in 4 samples, and more than 5.00 ㎍/㎏ in 2 samples(6.72 and 8.06 ㎍/㎏). In the case of granules, less than 1.00 ㎍/㎏ was observed in 19 samples, and between 1.00 and 5.00 ㎍/㎏ in 2 samples. The benzo[a]pyrene level of pills was significantly higher than that of granules (p < 0.05). The dietary exposure, acceptable daily intake, and margin of exposure levels of benzo[a]pyrene in the herbal medicinal products showed that the health risk from this polycyclic aromatic hydrocarbon was at a low and negligible level.

Key words : benzo[a]pyrene, herbal medicinal products, margin of exposure

서  론

Polycyclic aromatic hydrocarbons(PAHs)는 2개 이상의 벤젠 고리를 가지고 있는 다환방향족 탄화수소로서 유기물의 불완전연소로 발생하는 물질이다(1~2). 200여종의 유도체 화합물이 알려져 있으며, 현재 내분비계 장애물질이면서 이들의 발암성이 밝혀진 바 있다(3). 특히, PAHs 그룹에 속하는 벤조피렌[benzo(a)pyrene, B(a)P:3,4- benzopyrene; 1,2-benzopyrene]은 황색의 결정성 고체로 300~600℃의 온도에서 불완전 연소로 생성되어 유전독성과 발암성이 강한 것으로 알려져 최근 국제암연구소(International Agency for Research on Cancer, IARC)는 그룹 1(발암물질)로 분류하였다(4). 벤조피렌의 오염원은 매우 다양하다. 즉 벤조피렌은 환경오염 등으로 인해 조리·가공하지 않은 농산물 및 수산물 등의 식품에도 존재하고 식품을 조리·가공할 때 식품의 주성분인 탄수화물, 단백질, 지방 등이 열분해되어 생성되는 것으로 알려져 있다(2).

소비자들의 의식 수준이 높아짐에 따라 생약의 안전성, 건전성 확보에 대한 국민의 욕구가 날로 증가하고 있으며, 생약에 대한 소비자의 인식도 달라지고 있는 실정으로, 열처리 가공과정을 거치는 숙지황이나 다른 생약에서도 벤조피렌이 검출되어 가공과정을 거치는 생약제제 등 천연물신약의 경우에도 검출될 수 있다는 가능성이 제기되어 한약업계에 커다란 파장을 일으키면서 국민적 관심의 대상이 되고 있다.

우리나라 식품의약품안전청에서도 2001년부터 식품 중의 PAHs 모니터링 및 위해평가를 수행하여 벤조피렌에 대한 기준이 설정되었다. 식용유지 중 벤조피렌은 2.0 ㎍/㎏ 이하, 숙지황 및 건지황은 5.0 ㎍/㎏ 이하, 훈제어육과 훈제건조어육 중 벤조피렌은 각각 5.0 ㎍/㎏과 10.0 ㎍/㎏ 이하, 어류와 패류는 각각 2.0 ㎍/㎏과 10.0 ㎍/㎏ 이하, 흑삼과 흑삼농축액은 각각 2.0 ㎍/㎏과 4.0 ㎍/㎏ 이하로 기준을 설정하고 있다(5). 생약은 지황과 숙지황에 대해 벤조피렌은 5 ppb 이하로 기준이 설정되어 있으며(6) 이와 비슷한 가공과정을 거치는 흑삼에 대한 연구 등 다양한 연구(7~9)가 지속적으로 이루어지고 있다.

따라서 본 연구에서는 시중에 유통되고 있는 생약제제 중 벤조피렌의 오염실태를 조사하기 위하여 생약 중 숙지황 및 지황에 적용하는 벤조피렌 시험방법(6)을 기초로 추출 및 정제법에 대한 개선된 방법을 적용하여 벤조피렌을 분석하고 그 결과를 바탕으로 생약제제 안전성 확보와 기준 설정을 위한 기초자료를 제공하고자 한다.

재료 및 방법

1. 재료

본 실험에 사용된 재료는 2014년 서울시에서 유통되고 있는 생약제제 중 과립제 21건, 환제 8건 총 29건을 구입하여 분쇄하여 분말로 균질화하여 시험재료로 사용하였다(***).

2. 시약 및 기기

1) 시약

벤조피렌 표준품은 benzo[a]pyrenen solution (100 ㎍/mL in CH2Cl2) (Supelco,USA)를 사용하였으며, 시료의 추출과 분석에는 헥산, 디클로로메탄, 메탄올, 이소옥탄, 시클로헥산(Fisher scientific, USA)과 아세토니트릴(JT Baker,USA)을 사용하였고, 시료의 정제에는 플로리실 컬럼(Agilent Technoloies, USA)과 SDB-L(Phenomenex, USA)을 각각 사용하였다. 내부표준액인 3-메틸콜란트렌은 3-methylcholanthrene solution(100 ng/㎕  in acetonitrile) (Fluka, USA)을 사용하였다.

2) 장비

추출에 사용된 ultrasonicator는 Branson 8510 (USA)이며, 감압농축시 Buchi사의 Rotava- por R-200을 사용하였고, 용출액의 농축에는 질소농축기(EYELA MG-200, USA)를 사용하였다.

3) 분석기기

벤조피렌 정량분석을 위해 Fluorescence detector가 장착된 HPLC(Shimadzu, Japan)를 사용하였다.

3. 표준용액 조제

표준용액은 벤조피렌(100 ㎍/mL)을 3, 5, 10, 20, 40 ng/mL 5단계로 희석하고 각각의 희석액이 내부표준액인 3-메틸콜란트렌 50 ng/mL을 포함하도록 조제하여 검량선을 작성하였다.

Table 1. List of herbal medicinal products
제형	생약제제명	건수	생약명
과립제	곽향정기산	2	곽향, 자소엽, 백지, 대복피, 복령, 후박, 백출, 진피, 반하, 길경, 감초
	대시호탕	2	대황, 반하, 황금, 시호, 작약, 지실, 생강, 대추
	방풍통성산	2	당귀, 작약,천궁, 치자, 연교, 박하, 생강, 형개, 방풍, 마황, 대황, 망초, 길경, 백출, 감초 ·황금 ·석고, 활석
	삼황사심탕	2	대황, 황금, 황련
	시호가용골모려탕	2	황금, 인삼, 용골, 건강, 계지, 대추, 대황, 시호, 모려, 복령, 반하
	오적산	2	감초, 건강, 길경, 당귀, 마황, 반하, 백지, 복령, 계지, 작약, 지실, 진피, 천궁, 창출, 후박, 대추, 향부자
	용담사간탕	1	택사, 황금, 용담, 차전자, 치자, 당귀, 감초, 목통, 생지황
	을자탕	1	황금, 당귀, 대황, 감초, 승마, 시호
	평위산	2	감초, 대추, 생강, 진피, 창출, 후박
	향사평위산	2	감초, 곽향, 목향, 사인, 생강, 지실, 진피, 향부자, 창출, 후박
	향성파적환	1	천궁, 길경, 대황, 가자, 감초, 아선약, 연교, 박하, 사인
	형개연교탕	2	감초, 길경, 당귀, 방풍, 백지, 시호, 작약, 지각, 천궁, 치자, 형개, 연교, 황금
환제	거풍지보단	2	박하, 형개, 천궁, 치자, 백출, 작약, 황금, 황련, 황백, 당귀, 세신, 숙지황, 방풍, 강활, 독활, 석고, 마황, 연교, 감초, 길경, 인삼, 활석, 망초, 천마, 대황, 전갈
	안중조기환	2	향부자, 황련, 진피, 지실, 천궁, 당귀, 내복자, 감초, 자소자, 신곡, 목향, 백두구, 백출, 반하, 작약, 복신
	연라환	2	황련, 개자, 내복자, 치자, 삼릉, 천궁, 아출, 향부자, 도인, 산사, 신곡, 오수유, 익지, 청피
	을자탕	1	황금, 당귀, 대황, 감초, 승마, 시호
	향성파적환	1	천궁, 길경, 대황, 가자, 감초, 아선약, 연교, 박하, 사인
※ 밑줄이 들어간 생약은 조 등(10)의 논문에서 벤조피렌이 검출된 생약임

4. 분석조건

1) 분석법 탐색

원료 생약인 지황과 숙지황에 적용하는 대한민국약전 일반시험법의 생약시험법에 수재된 분석방법을 생약제제인 과립제와 환제 분석에 적용하는데 있어 보다 효율적인 분석방법을 탐색하고자 하였다.

2) 분석법 유효성 검증

본 실험방법의 유효성을 검증하기 위하여 대한민국약전 제 10개정 ‘의약품등 시험방법 밸리데이션 가이드라인’에 근거하여 직선성(linearity), 정확성(accuracy), 정밀성(precision), 검출한계(limit of detection) 및 정량한계(1imit of quantification)를 평가하여 입증하였다.

5. 생약제제 중 벤조피렌 오염도 조사 및 위해도 평가

과립제 21건, 환제 8건 등 총 29건의 생약제제에 대하여 4. 분석조건에 따라 추출․정제한 시료를 HPLC에 주입하여 벤조피렌의 함량을 구하였다.

노출 평가에 필요한 통계 값들은 시료의 포장지에 표기되어 있는 1회 섭취량 및 1일 섭취 횟수에 따라서 1일 섭취량을 구하였으며, 평균체중은 2004년 산업자원부 기술표준원(13)에서 제시하고 있는 남자 69.6 ㎏, 여자 56.4 ㎏의 평균 63 ㎏을 이용하였고, 기대수명은 통계청의 2013년 생명표(14)의 남자 78.5세, 여자 85.1세의 평균 82세를 적용하여 계산하였다.

초과발암위해도(Excess cancer risk)는 만성일일노출량(ADD)과 미국 환경보호청(U.S.EPA)의 IRIS(Intergrated risk information system) (15)의 BaP 발암력 7.3 ㎎/㎏/day를 곱하여 산출하였다. 또한 노출분포를 추정한 후 용량-반응 곡선 상에서 정의된 용량은 BmLD(Benchmark dose lower bound confidence limit)의 최소값인 0.10 ㎎/㎏ bw/day의 값을 적용하고 실제 인체노출량(Dietary Exposure)와의 비율인 노출안전역(Margin of exposure, MOE)을 산출하였다.

결과 및 고찰

1. 분석법 탐색

1) 추출

환제 3건과 과립제 3건을 택하여 대한민국약전 벤조피렌 시험법에 따라(6) 물로 추출한 후 헥산으로 재추출하여 분획하는 과정에서 지황이나 숙지황 등 원료 생약에 비해 에멀젼이 심하게 형성되어 분리하는데 시간이 많이 소요되므로, 물로 추출하는 과정을 생략하고 바로 헥산으로 추출하여 여과한 여액을 증발농축하여 아세토니트릴 2 mL에 녹인 액을 분석시료로 하여 내부표준물질의 회수율을 비교한 결과 물로 추출하여 헥산으로 재추출한 방법과 거의 동일한 결과를 얻었다(***).

Table 2. Comparision in recovery rates of 3-MC according to extraction methods

(단위 : %)

Extraction		Granule				Globular
Water+hexane		94.5±2.9	96.9±2.4	93.3±2.5		70.2±1.9	80.1±1.3	70.8±3.2
Hexane only		96.3±1.8	97.4±2.8	94.5±2.0		69.8±2.2	82.5±2.1	72.4±2.7

* 3-MC : 3-methylcholanthrene

Table 3. Recovery rates of 3-MC using Florisil and SDB-L cartridge

(단위 : %)

Cartridge		Granule				Globular
Florisil		70.6±2.9	87.4±2.4	73.5±1.8		47.4±1.9	34.0±1.9	16.9±1.1
SDB-L		71.5±1.8	86.6±2.8	71.7±2.1		66.4±2.2	49.9±1.6	66.9±2.3

2) 정제

헥산 추출액 2 mL를 플로리실 카트리지를 이용하여 정제한 후 내부표준물질을 이용하여 회수율을 구한 결과 과립제는 70.6~87.4%로 비교적 높은 회수율을 나타내었으나, 환제는 16.9~47.4%으로 낮은 회수율을 나타내었다. 이를 개선하기 위하여 회수율이 좋다고 알려진 SDB-L 카트리지(9)를 사용하여 내부표준물질의 회수율을 비교한 결과 과립제는 SDB-L 카트리지로 정제하였을 때 71.5~86.6%로 70.6~87.4%인 플로리실 카트리지와 큰 차이를 보이지 않았으나, 환제는 플로리실 카트리지로 정제하였을 때 16.9~47.4%인 반면 SDB-L 카트리지는 49.9~66.9%로 회수율이 증가하였다(***). 다만 SDB-L 카트리지로 정제한 용출액을 분석하였을 때 주성분의 방해 피크가 보인 반면, 플로리실 카트리지로 정제한 용출액에서는 분리도가 양호하였으므로 정제 카트리지는 그대로 플로리실 카트리지를 사용하고, 대신 시료량을 5.0 g에서 1.5 g으로 줄이고 이후 조작은 동일하게 한 결과 헥산 추출액과 정제 후 용출액에 대한 내부표준물질의 회수율이 증가하는 것을 확인하였다(***).

또한 용출액을 10, 20, 30 mL로 변경하였을 때, 최소용량인 10 mL에서 주성분 및 내부표준물질이 모두 용출되어, 질소농축에 걸리는 시간을 단축하기 위해 용출액 용량을 20 mL에서 10 mL로 변경하였다.

3) 벤조피렌 분석

생약 중 숙지황의 벤조피렌시험법이나 대부분 논문에서 형광검출기로 분석할 때 사용하는 조건인 여기파장 294 nm, 방출파장 404 nm 대신 벤조피렌의 최대파장인 296 nm와 414 nm로 변경한 결과 감도가 약 10%로 증가하고 주성분의 분리도에 큰 영향이 없으므로 변경된 파장으로 분석하였다.

이상의 결과를 종합하여 생약제제인 과립제와 환제에 적용한 분석법은 다음과 같다. 균일하게 분쇄한 시료 약 1.5 g을 정밀하게 달아 헥산 약 100 mL와 내부표준액 1 mL을 넣어 30분간 초음파 추출하고 잔류물을 여과한 다음 여액을 45℃의 수욕상에서 감압 농축하여 약 2 mL로 하였다. 디클로로메탄 10 mL 및 헥산 20 mL를 순서대로 초당 2~3방울의 속도로 용출시켜 활성화시킨 플로리실 카트리지에 시료를 넣고 헥산․디클로로메탄혼합액(3:1) 10 mL를 초당 2~3 방울의 속도로 용출시켰다. 용출액을 35℃의 질소가스하에 날려 보낸 후 잔류물을 아세토니트릴 1 mL에 녹여 0.45 ㎛ 이하의 멤브레인필터로 여과한 여액을 HPLC에 주입하여 ***의 조건에서 벤조피렌을 분석하였다.

Table 4. Recovery rates of 3-MC in globular type of herbal medicinal products according to sample amount (단위 : %)
Sample(g)		Extraction				Purification
5.0		69.8±2.2	82.5±2.1	72.4±2.7		47.4±1.9	34.0±1.9	16.9±1.1
1.5		97.2±2.4	93.5±2.9	92.6±1.9		84.7±2.2	55.2±1.6	50.9±2.3

Table 5. The analytical conditions of HPLC for benzo[a]pyrene
Parameters	Conditions
Column	XbridgeTM C18(3.5 ㎛, 4.6×250 mm)
Moblie phase	Acetonitrile : Water = 80:20
Flow rate	1.0 mL/min
Floresscene detector	Excitation 296nm, Emission 414 nm
Injection volumn	10 ㎕

2. 분석법 유효성 검증 및 회수율 실험

벤조피렌 검량선 작성을 위하여 표준용액을 조제한 후 기기에 주입하여 얻어진 피크면적으로 검량선을 작성하였다. 그 결과 상관계수(R2)가 0.9999 이상의 우수한 직선성을 나타내었고, 검출한계와 정량한계는 반응의 표준편차와 검량선의 기울기에 근거하여 구하였으며 검출한계는 0.02 ㎍/㎏, 정량한계는 0.07 ㎍/㎏으로 나타났다. 이는 장 등의 검출한계 0.007 ㎍/kg, 정량한계 0.02 ㎍/kg(7)보다 다소 높았고, 조 등이 제시한 검출한계 0.25 ng/mL, 정량한계 0.75 ng/mL(8)보다는 낮게 나타났다.

회수율은 벤조피렌이 거의 검출되지 않은 생약제제 1.5 g에 헥산 100 mL을 가한 후 여기에 표준용액 5 ㎍/㎏ 1 mL과 3-메틸콜란트렌 50 ng/kg 1 mL를 첨가하여 위의 분석방법과 동일하게 실험하였다. 내부표준법에 의해 검량선을 작성하고 면적비로 정량을 하였으며 3회 반복 실험한 결과, 회수율은 102.2%이고 RSD는 3.1%였다(n=3).

3. 생약제제 중 벤조피렌 오염도 조사 및 위해도 평가

1) 벤조피렌 오염도 조사

시중에서 유통되는 생약제제 29건(과립제 21건, 환제 8건)을 검사한 결과, 벤조피렌의 농도는 0.02~8.06 ㎍/㎏ 범위였으며, 29건의 평균 농도는 1.07 ㎍/㎏이었다. 그 중 과립제는 0.02~3.31 ㎍/㎏로 평균 0.36 ㎍/㎏인 반면, 환제는 0.06~ 8.06 ㎍/㎏로 평균 2.92 ㎍/㎏이었다(***). 농도구간별로 과립제는 1.00 ㎍/㎏ 이하가 19건, 1.00~5.00 ㎍/㎏이 2건인 반면, 환제는 1.00 ㎍/㎏ 이하가 2건, 1.00~5.00 ㎍/㎏이 4건, 5.00 ㎍/㎏ 이상이 2건으로 환제가 과립제에 비해 벤조피렌의 검출량이 높음을 확인하였다(****).

정 등(16)은 중금속이 높게 검출된 한약재를 탕으로 제조하여 중금속 이행률을 알아본 결과 납, 카드뮴의 경우 탕으로 추출한 후 중금속의 이행률이 현저하게 저하되는 경향이라고 보고하였고, 김 등(17)의 연구결과도 엑스 형태의 원료를 사용한 제제가 원생약을 바로 가루로 만들어 사용한 제제보다 납, 비소, 카드뮴의 함유량이 유의성 있게 낮게 나타났다고 보고하고 있다. 생약제제 중 벤조피렌도 물로 추출‧농축하여 제조하는 과립제보다 한약재를 바로 혹은 볶아서 가루로 하여 제조하는 환제에서 더 많이 검출되는 것을 확인하였다.

2) 위해도 평가

시료의 초과발암위해도는 인체노출평가 방법을 적용한 만성일일 인체노출량과 BaP 발암력 7.3 mg/kg/day를 곱하여 구하였다. 생약제제 29건의 초과발암위해도는 1.25[eqn: TIMES]10-8 ~6.03[eqn: TIMES]10-6(평균 7.74[eqn: TIMES]10-7)로 생약제제 섭취로 인한 위상부암의 초과발암위해도는 천만명당 8명의 수준으로 나타났다. 숙지황 중 벤조피렌 기준인 5 ppb를 초과하여 검출된 연라환 2건의 초과발암위해도는 6.03[eqn: TIMES]10-6, 5.86[eqn: TIMES]10-6로 다소 높으나 식품 중 기타가공품으로 분류되는 환제의 평균 초과발암위해도인 7.09[eqn: TIMES]10-6(18)과 비슷한 수준이었으며, 성인 하루의 식사패턴을 통한 초과발암위해도인 6.4[eqn: TIMES]10-5(19)보다 적다고 할 수 있다.

Fig. 1.  Distribution of benzo(a)pyrene concentra- tion in herbal medicinal products(㎍/㎏).

또한 생약제제의 노출안전역은 평균 5,817,248로 ***에서 정한 1,000,000을 초과하여 negligible concern 수준으로 안전한 것으로 평가되었으며, 환제 8건 중 연라환 2건은 low concern, 4건은 negligible concern with action minimizing exposure, 2건은 negligible concern 수준인 반면, 과립제는 21건 중 2건만 negligible concern with action minimizing exposure 수준이고 19건은 negligible concern 수준으로 대부분 안전하였다.

결  론

서울시에서 유통되고 있는 생약제제 중 함유되어 있는 벤조피렌을 정확히 분석하기 위하여 숙지황 및 지황에 적용하는 벤조피렌 분석법을 기본으로 추출 및 정제, 분석파장에 대한 최적 조건을 탐색하였으며, 그에 따라 과립제 21건, 환제 8건 총 29건에 대하여 벤조피렌 분석을 실시하였다. HPLC-FLD를 사용해 벤조피렌의 오염 실태를 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다.

Table 6. Content, excess cancer risk and margin of exposure of benzopyrene in herbal medicinal products
처방명 (건수)		Content (mean±SD, ㎍/㎏)	ADD (㎍/㎏.bw/day)	Excess cancer risk	Dietary dose (㎍/㎏)	Benchmark dose limit (㎍/㎏ bw day)	Margin of exposure (MOE)
과 립 제 (21)	곽향정기산 (2)	0.06±0.01	5.12[eqn: TIMES]10-6	3.74[eqn: TIMES]10-8	8.57[eqn: TIMES]10-6	100	11,666,667
		0.06±0.02	8.54[eqn: TIMES]10-6	6.23[eqn: TIMES]10-8	1.43[eqn: TIMES]10-5	100	7,000,000
	대시호탕 (2)	0.12±0.07	1.71[eqn: TIMES]10-5	1.25[eqn: TIMES]10-7	2.86[eqn: TIMES]10-5	100	3,500,000
		0.10±0.02	7.11[eqn: TIMES]10-6	5.19[eqn: TIMES]10-8	1.19[eqn: TIMES]10-5	100	8,400,000
	방풍통성산 (2)	0.07±0.02	9.96[eqn: TIMES]10-6	7.27[eqn: TIMES]10-8	1.67[eqn: TIMES]10-5	100	6,000,000
		0.02±0.00	1.71[eqn: TIMES]10-6	1.25[eqn: TIMES]10-8	2.86[eqn: TIMES]10-6	100	35,000,000
	삼황사심탕 (2)	0.19±0.05	1.08[eqn: TIMES]10-5	7.89[eqn: TIMES]10-8	1.81[eqn: TIMES]10-5	100	5,526,316
		0.14±0.05	1.99[eqn: TIMES]10-5	1.45[eqn: TIMES]10-7	3.33[eqn: TIMES]10-5	100	3,000,000
	시호가용골모려탕 (2)	0.06±0.01	5.12[eqn: TIMES]10-6	3.74[eqn: TIMES]10-8	8.57[eqn: TIMES]10-6	100	11,666,667
		0.09±0.02	1.28[eqn: TIMES]10-5	9.35[eqn: TIMES]10-8	2.14[eqn: TIMES]10-5	100	4,666,667
	오적산 (2)	0.79±0.08	5.62[eqn: TIMES]10-5	4.10[eqn: TIMES]10-7	9.40[eqn: TIMES]10-5	100	1,063,291
		0.34±0.09	3.39[eqn: TIMES]10-5	2.47[eqn: TIMES]10-7	5.67[eqn: TIMES]10-5	100	1,764,706
	용담사간탕	0.32±0.05	2.73[eqn: TIMES]10-5	1.99[eqn: TIMES]10-7	4.57[eqn: TIMES]10-5	100	2,187,500
	을자탕	0.07±0.01	9.96[eqn: TIMES]10-6	7.27[eqn: TIMES]10-8	1.67[eqn: TIMES]10-5	100	6,000,000
	평위산 (2)	1.04±0.04	1.04[eqn: TIMES]10-4	7.56[eqn: TIMES]10-7	1.73[eqn: TIMES]10-4	100	576,923
		0.29±0.07	2.48[eqn: TIMES]10-5	1.81[eqn: TIMES]10-7	4.14[eqn: TIMES]10-5	100	2,413,793
	향사평위산 (2)	0.04±0.01	2.85[eqn: TIMES]10-6	2.08[eqn: TIMES]10-8	4.76[eqn: TIMES]10-6	100	21,000,000
		3.31±0.18	1.88[eqn: TIMES]10-4	1.38[eqn: TIMES]10-6	3.15[eqn: TIMES]10-4	100	317,221
	향성파적환	0.06±0.02	4.27[eqn: TIMES]10-6	3.12[eqn: TIMES]10-8	7.14[eqn: TIMES]10-6	100	14,000,000
	형개연교탕 (2)	0.13±0.04	1.85[eqn: TIMES]10-5	1.35[eqn: TIMES]10-7	3.10[eqn: TIMES]10-5	100	3,230,769
		0.23±0.05	1.96[eqn: TIMES]10-5	1.43[eqn: TIMES]10-7	3.29[eqn: TIMES]10-5	100	3,043,478
	소계 평균	0.36	2.80[eqn: TIMES]10-5	2.04[eqn: TIMES]10-7	4.68[eqn: TIMES]10-5	100	7,239,238
환 제 (8)	거풍지보단 (2)	0.54±0.09	5.76[eqn: TIMES]10-5	4.21[eqn: TIMES]10-7	9.64[eqn: TIMES]10-5	100	1,037,037
		1.22±0.11	1.04[eqn: TIMES]10-4	7.60[eqn: TIMES]10-7	1.74[eqn: TIMES]10-4	100	573,770
	안중조기환 (2)	2.72±0.31	3.56[eqn: TIMES]10-4	2.60[eqn: TIMES]10-6	5.96[eqn: TIMES]10-4	100	167,839
		2.24±0.24	2.10[eqn: TIMES]10-4	1.54[eqn: TIMES]10-6	3.52[eqn: TIMES]10-4	100	284,091
	연라환 (2)	8.06±0.48	8.26[eqn: TIMES]10-4	6.03[eqn: TIMES]10-6	1.38[eqn: TIMES]10-3	100	72,374
		6.72±0.36	8.03[eqn: TIMES]10-4	5.86[eqn: TIMES]10-6	1.34[eqn: TIMES]10-3	100	74,405
	을자탕	1.80±0.14	1.28[eqn: TIMES]10-4	9.35[eqn: TIMES]10-7	2.14[eqn: TIMES]10-4	100	466,667
	향성파적환	0.06±0.01	4.27[eqn: TIMES]10-6	3.12[eqn: TIMES]10-8	7.14[eqn: TIMES]10-6	100	14,000,000
	소계 평균	2.92	3.11[eqn: TIMES]10-4	2.27[eqn: TIMES]10-6	5.21[eqn: TIMES]10-4	100	2,084,523
	전체 평균	1.07	1.06[eqn: TIMES]10-4	7.74[eqn: TIMES]10-7	1.78[eqn: TIMES]10-4	100	5,817,248

1.  생약제제 29건의 벤조피렌의 농도는 0.02~ 8.06 ㎍/㎏(평균 1.07 ㎍/㎏)였으며, 농도구간별로 과립제는 ≤1.00 ㎍/㎏은 19건, 1.00~ 5.00 ㎍/㎏은 2건인 반면, 환제는 ≤1.00 ㎍/㎏은 2건, 1.00~5.00 ㎍/㎏은 4건, ≥5.00 ㎍/㎏ 2건으로 환제가 과립제에 비해 벤조피렌의 검출량이 높았다.

2.  생약제제 29건의 초과발암위해도는 평균 7.74[eqn: times]10-7로 생약제제 섭취로 인한 위상부암의 초과발암위해도는 천만명당 8명의 수준이었으며, 검출량이 높게 나온 연라환 2건의 초과발암위해도는 6.03[eqn: times]10-6, 5.86[eqn: times]10-6로 백만명당 6명 수준이었다.

3.  생약제제의 노출안전역(MOE)은 평균 5,817,248로 안전한 것으로 평가되었으며, 연라환 2건은 low concern 수준인 반면, 나머지 27건 중 6건은 negligible concern with action mini- mizing exposure, 나머지 21건은 negligible concern 수준이었다.

Table 7. Margin of exposure(MOE) banding index by food standard agency
MOE band
[eqn: <] 10,000	Possible concern
10,000~1,000,000	Low concern
[eqn: >] 100,000	Negligible concern with action minimizing future exposure
[eqn: >] 1,000,000	Negligible concern

이상의 결과를 보면 생약제제에서 벤조피렌이 0.02~8.06 ㎍/㎏ 농도로 검출되고, 환제 중 일부에서는 검출량이 비교적 높게 나타났으나 위해성평가에서 초과발암위해도 및 노출안전역을 검토하였을 때 비교적 안전한 수준으로 판단되며, 보다 정확한 모니터링을 위하여 환제에 대한 벤조피렌 실태조사를 지속적으로 실시하여 그에 대한 위해성평가를 통해 생약제제에 대한 벤조피렌 기준이 설정되어야 할 것이다.

참고문헌

1.  Columbia analytical services : U.S. EPA METHOD 610-Polynuclear Aromatic Hydro- carbons, Methods for organic chemical analysis of municipal and industrial waste water, 1999.

2.  식품의약품안전평가원 : 생약의 벤조피렌 시험법 해설서. p.3, 2009.

3.  Shubik, P and Hartwell, JL : Survey of compounds which have been tested for carcinogenic activity. Federal Security Agency, US Public Health Service, Washington, D. C. publication no. 149, 1957.

4. Agency for Toeic Substances and Disease Registry (ATSDR) : Toxicological profile for polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs). U. S. Department of Health and Human Service, Public Health Service, p.1, 1995.

5. 식품의약품안전처 : 식품공전. 2014.

6. 식품의약품안전처 : 대한민국약전 제10개정. 2013.

7. 장미라, 홍미선, 정소영, 최부철, 이경아, 금진영, 김일영, 김정헌, 채영주 : 식용유지류 중 벤조피렌의 함량 분석 및 안전성 평가. 한국식품위생안전성학회지, 29:141~145, 2014.

8. 조영호, 송규용, 백명기, 이종화, 이계원 : 흑삼에서 벤조피렌의 추출 조건 및 분석방법에 관한 연구. 약학회지, 56(3):145~151, 2012.

9.  정소영, 박주성, 손여준, 최수정, 김미선, 박소현, 이상미, 이재인, 유인실, 채영주 : 커피중의 벤조피렌 분석법 개발 및 함량 조사. 서울특별시보건환경연구원보, 45:12~20, 2009.

10. 조성애, 김수진, 김남훈, 정삼주, 김화순, 김경식, 한기영, 채영주 : 한약재 중 벤조피렌의 함량 분석. 서울특별시 보건환경연구원보, 47: 94~102, 2011.

11.  김미선 : 고체상 추출방법을 이용한 참기름 중 벤조피렌의 정량. 단국대학교 석사논문, 2009.

12.  Sunil, KJ and Seema, A : Fluorescence spectral study of the solubilization of benzo[a]pyrene in mecellar surfactant solution. Int. J. Geology, Earth and Environmental Science, 4:202~205, 2014.

13.  산업자원부 기술표준원 : 한국인의 인체이수조사사업의 학술용역연구결과보고서. 2004.

14. 통계청 : 생명표. 2013.

15.  Nisbet, C and Lagoy, P : Toxic equivalency factors(TEFs) for polycyclic aromatic hydrocarbons(PAHs). Toxicol. Pharmacol., 16:290~300, 1992.

16.  정삼주, 강성태, 한창호, 김수진, 고숙경, 김윤희, 김유경, 김복순, 최병현 : 한약재의 약용부위별 중금속 함량 및 탕 액에서의 이행률 조사. 한국식품위생안전성학회지, 25:402~409, 2010.

17.  김정곤, 이명숙, 고숙경, 한은정, 이현경, 정애희, 김정헌, 채영주 : 유통중인 생약제제 중 중금속 함유량 연구. 보건환경연구원보, 48: 83~90, 2012.

18.  이성득 : 유통환제의 유해물질 함량 및 위해도 평가. 단국대학교 박사논문, 2011.

19.  김윤희, 윤은경, 이효민, 박경아, 전은아, 이철호, 회상윤, 임승택, 제금련, 최광식 : 한국인의 모델식이에 대한 다환방향족탄화수소류(PAHs)의 인체노출평가. 한국식품위생안전성학회지, 19:176~184, 2004.