PCR 수행 및 결과 기록지

실험일자

2015. 7. 24~25.

시   료

돌고래 혈청

(세부내역 결과 참조)

목    적

톡소플라스마 (Toxoplasma gondii) 검출

시     약

설  명

단위량

(㎕)

PCR protocol

Process

℃

Time

Cycles

Template

혈청 추출 DNA

2

Pre-denaturation

94

5 min

Primer-F

kit 포함

-

Denaturation

94

30 sec

× 40

Primer-R

kit 포함

-

Annealing

52

30 sec

Polymerase

kit 포함

-

Extension

72

40 sec

ddH2O

18

Final extension

72

5 min

합계

20

결     과

* RNA추출 : G-spinTM genomicDNA extraction kit (인트론바이오)

* 전기영동 : 1.2% agarose gel / Midori green 2㎕ / 100V / 20min.

* 시료세부내역 및 결과

lane번호	사용 Primer	양성밴드 (시퀀싱결과)	동물명(동물번호)	시료(조직)	결과
2	kit 포함	406 bp	태평양돌고래 금등(M6-1-1-12)	혈청	음성
3	kit 포함	406 bp	태평양돌고래 대포(M6-1-1-13)	혈청	음성
4	kit 포함	406 bp	태평양돌고래 태지(M6-1-1-16)	혈청	음성

* 전기영동 사진

1   2    3   4    5    6

lane 1 : 100bp marker

lane 2, 3, 4 : sample1, 2, 3

lane 5 : positive control

lane 6 : 100bp marker