PCR 수행 및 결과 기록지

실험일자	2012. 8. 25 ~ 9. 2.		시 료	열대조류관 전시․사육조류 분변 28건 (세부내역 결과 참조)
목 적	조류 보나바이러스 (avian bornavirus) 검출
시 약	설 명	단위량 (㎕)	one step RT-PCR 조건
			Process		℃	Time	Cycles
Template	조직(분변) 추출 RNA	2	Reverse transcription reaction		45	30 min
Primer	ABV-Foward	1	Inactivation of RTase		94	5 min
Primer	ABV-Reward	1	Denaturation		94	30 sec	× 40
Polymerase	i-star Taq	-	Annealing		50	30 sec
ddH2O		16	Extension		72	30 sec
합계		20	Final extension		72	7 min
RNA추출	Viral Gene DNA/RNA extraction kit (인트론바이오)
전기영동	2% agarose gel / Midori green 6㎕ / 100V / 22min.

시료세부내역

및 결과

<<사랑앵무, 오색앵무 (8/25)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	오색앵무	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	오색앵무	분변	양성
3	ABV-L gene	511 bp	오색앵무	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	오색앵무	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	오색앵무	분변	음성
8	BDV-M gene	327 bp	장미앵무	분변	양성
9	BDV-N gene	366 bp	장미앵무	분변	양성
10	ABV-L gene	511 bp	장미앵무	분변	양성
11	ABV-M gene	337 bp	장미앵무	분변	양성
12	ABV-N gene	373 bp	장미앵무	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3    4    5    6    7    8    9    10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 7 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<유황앵무 2수 (8/26)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	시트론유황앵무	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	시트론유황앵무	분변	양성
3	ABV-L gene	511 bp	시트론유황앵무	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	시트론유황앵무	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	시트론유황앵무	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	유황앵무(번식장)	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	유황앵무(번식장)	분변	양성
9	ABV-L gene	511 bp	유황앵무(번식장)	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	유황앵무(번식장)	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	유황앵무(번식장)	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3     4    5     6    7    8    9    10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6  : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<유황앵무, 야자앵무 (8/26)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	유황앵무(번식장)	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	유황앵무(번식장)	분변	양성
3	ABV-L gene	511 bp	유황앵무(번식장)	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	유황앵무(번식장)	분변	양성
5	ABV-N gene	373 bp	유황앵무(번식장)	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	야자앵무(계류장)	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	야자앵무(계류장)	분변	양성
9	ABV-L gene	511 bp	야자앵무(계류장)	분변	양성
10	ABV-M gene	337 bp	야자앵무(계류장)	분변	양성
11	ABV-N gene	373 bp	야자앵무(계류장)	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3    4    5    6    7    8    9    10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<뉴기니아 2수 (8/27)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	뉴기니아앵무	분변	양성
2	BDV-N gene	366 bp	뉴기니아앵무	분변	양성
3	ABV-L gene	511 bp	뉴기니아앵무	분변	양성
4	ABV-M gene	337 bp	뉴기니아앵무	분변	양성
5	ABV-N gene	373 bp	뉴기니아앵무	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	뉴기니아(훈련장)	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	뉴기니아(훈령장)	분변	음성
9	ABV-L gene	511 bp	뉴기니아(훈련장)	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	뉴기니아(훈련장)	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	뉴기니아(훈련장)	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3     4    5    6   7    8    9   10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<왕관앵무, 오색앵무 (8/27)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	왕관앵무	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	왕관앵무	분변	양성
3	ABV-L gene	511 bp	왕관앵무	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	왕관앵무	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	왕관앵무	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	오색앵무(초롱이)	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	오색앵무(초롱이)	분변	양성
9	ABV-L gene	511 bp	오색앵무(초롱이)	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	오색앵무(초롱이)	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	오색앵무(초롱이)	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3    4    5    6    7    8    9   10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<< 몽크앵무, 오색앵무 (8/28)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	몽크앵무(삐용)	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	몽크앵무(삐용)	분변	음성
3	ABV-L gene	511 bp	몽크앵무(삐용)	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	몽크앵무(삐용)	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	몽크앵무(삐용)	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	오색앵무(기봉)	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	오색앵무(기봉)	분변	음성
9	ABV-L gene	511 bp	오색앵무(기봉)	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	오색앵무(기봉)	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	오색앵무(기봉)	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3    4    5    6    7    8    9   10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6             : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<몽크앵무, 오색앵무 (8/28)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	몽크앵무(뚜바)	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	몽크앵무(뚜바)	분변	음성
3	ABV-L gene	511 bp	몽크앵무(뚜바)	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	몽크앵무(뚜바)	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	몽크앵무(뚜바)	분변	음성
6	BDV-M gene	327 bp	오색앵무(죠이)	분변	음성
7	BDV-N gene	366 bp	오색앵무(죠이)	분변	음성
8	ABV-L gene	511 bp	오색앵무(죠이)	분변	음성
9	ABV-M gene	337 bp	오색앵무(죠이)	분변	음성
10	ABV-N gene	373 bp	오색앵무(죠이)	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3    4    5    6     7    8    9   10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 : 시료

lane 11 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<오색앵무, 홍금강앵무 (8/29)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	오색앵무(파랑)	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	오색앵무(파랑)	분변	음성
3	ABV-L gene	511 bp	오색앵무(파랑)	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	오색앵무(파랑)	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	오색앵무(파랑)	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	홍금강앵무(밍밍)	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	홍금강앵무(밍밍)	분변	음성
9	ABV-L gene	511 bp	홍금강앵무(밍밍)	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	홍금강앵무(밍밍)	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	홍금강앵무(밍밍)	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3    4    5    6    7    8    9   10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<회색앵무, 유황앵무 (8/29)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	회색앵무(레이)	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	회색앵무(레이)	분변	음성
3	ABV-L gene	511 bp	회색앵무(레이)	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	회색앵무(레이)	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	회색앵무(레이)	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	유황앵무(까꿍)	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	유황앵무(까꿍)	분변	음성
9	ABV-L gene	511 bp	유황앵무(까꿍)	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	유황앵무(까꿍)	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	유황앵무(까꿍)	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3    4    5    6    7    8    9   10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<유황앵무, 야자앵무 (9/1)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	유황앵무(멍이)	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	유황앵무(멍이)	분변	음성
3	ABV-L gene	511 bp	유황앵무(멍이)	분변	양성
4	ABV-M gene	337 bp	유황앵무(멍이)	분변	양성
5	ABV-N gene	373 bp	유황앵무(멍이)	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	야자앵무(야자)	분변	양성
8	BDV-N gene	366 bp	야자앵무(야자)	분변	양성
9	ABV-L gene	511 bp	야자앵무(야자)	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	야자앵무(야자)	분변	양성
11	ABV-N gene	373 bp	야자앵무(야자)	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3    4    5    6    7    8    9   10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<백색유황앵무, 유황앵무 (9/1)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	백색유황앵무	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	백색유황앵무	분변	음성
3	ABV-L gene	511 bp	백색유황앵무	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	백색유황앵무	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	백색유황앵무	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	유황앵무(멍이)	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	유황앵무(멍이)	분변	음성
9	ABV-L gene	511 bp	유황앵무(멍이)	분변	양성
10	ABV-M gene	337 bp	유황앵무(멍이)	분변	양성
11	ABV-N gene	373 bp	유황앵무(멍이)	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3    4    5    6    7    8    9   10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<구관조, 파랑새 (9/1)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	구관조	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	구관조	분변	음성
3	ABV-L gene	511 bp	구관조	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	구관조	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	구관조	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	파랑새	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	파랑새	분변	음성
9	ABV-L gene	511 bp	파랑새	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	파랑새	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	파랑새	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3    4    5    6    7    8    9   10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<검은머리장수앵무, 구관조 (9/2)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	검은머리장수앵무(또치)	분변	양성
2	BDV-N gene	366 bp	검은머리장수앵무(또치)	분변	양성
3	ABV-L gene	511 bp	검은머리장수앵무(또치)	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	검은머리장수앵무(또치)	분변	양성
5	ABV-N gene	373 bp	검은머리장수앵무(또치)	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	구관조	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	구관조	분변	음성
9	ABV-L gene	511 bp	구관조	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	구관조	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	구관조	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3    4    5    6    7    8    9   10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<구관조 2수 (9/2)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	구관조	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	구관조	분변	음성
3	ABV-L gene	511 bp	구관조	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	구관조	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	구관조	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	구관조	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	구관조	분변	음성
9	ABV-L gene	511 bp	구관조	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	구관조	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	구관조	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3    4    5    6    7    8    9   10   11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6 : 100 bp ladder