PCR 수행 및 결과 기록지

실험일자	2012. 7. 25 ~ 8. 8.		시 료	열대조류관 전시․사육조류 분변 17건 (세부내역 결과 참조)
목 적	조류 보나바이러스 (avian bornavirus) 검출
시 약	설 명	단위량 (㎕)	one step RT-PCR 조건
			Process		℃	Time	Cycles
Template	조직(분변) 추출 RNA	2	Reverse transcription reaction		45	30 min
Primer	ABV-Foward	1	Inactivation of RTase		94	5 min
Primer	ABV-Reward	1	Denaturation		94	30 sec	× 40
Polymerase	i-star Taq	-	Annealing		50	30 sec
ddH2O		16	Extension		72	30 sec
합계		20	Final extension		72	7 min
RNA추출	Viral Gene DNA/RNA extraction kit (인트론바이오)
전기영동	2% agarose gel / Midori green 6㎕ / 100V / 22min.

시료세부내역

및 결과

<<사랑앵무 2수 (7/25)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	사랑앵무 1	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	사랑앵무 1	분변	음성
3	ABV-L gene	511 bp	사랑앵무 1	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	사랑앵무 1	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	사랑앵무 1	분변	음성
8	BDV-M gene	327 bp	사랑앵무 2	분변	음성
9	BDV-N gene	366 bp	사랑앵무 2	분변	음성
10	ABV-L gene	511 bp	사랑앵무 2	분변	음성
11	ABV-M gene	337 bp	사랑앵무 2	분변	음성
12	ABV-N gene	373 bp	사랑앵무 2	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3    4     5    6    7     8    9    10   11   12

lane 1, 2, 3, 4, 5 : 시료

lane 6            : Negative control

lane 7            : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<오색앵무 2수 (7/28)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	오색앵무 1	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	오색앵무 1	분변	음성
3	ABV-L gene	511 bp	오색앵무 1	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	오색앵무 1	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	오색앵무 1	분변	음성
8	BDV-M gene	327 bp	오색앵무 2	분변	음성
9	BDV-N gene	366 bp	오색앵무 2	분변	음성
10	ABV-L gene	511 bp	오색앵무 2	분변	음성
11	ABV-M gene	337 bp	오색앵무 2	분변	음성
12	ABV-N gene	373 bp	오색앵무 2	분변	음성

전기영동 사진

1    2    3     4    5     6    7    8    9    10   11   12

lane 1, 2, 3, 4, 5, 8, 9, 10, 11, 12 : 시료

lane 6  : Negative control

lane 7  : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<붉은코뿔새 2수 (7/29)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	붉은코뿔새 1	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	붉은코뿔새 1	분변	양성
3	ABV-L gene	511 bp	붉은코뿔새 1	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	붉은코뿔새 1	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	붉은코뿔새 1	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	붉은코뿔새 2	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	붉은코뿔새 2	분변	음성
9	ABV-L gene	511 bp	붉은코뿔새 2	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	붉은코뿔새 2	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	붉은코뿔새 2	분변	음성

전기영동 사진

1     2    3    4    5    6     7    8    9    10   11   12

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6, 12 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<호금조 2수 (7/30)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	호금조 1	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	호금조 1	분변	양성
3	ABV-L gene	511 bp	호금조 1	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	호금조 1	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	호금조 1	분변	양성
7	BDV-M gene	327 bp	호금조 2	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	호금조 2	분변	양성
9	ABV-L gene	511 bp	호금조 2	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	호금조 2	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	호금조 2	분변	양성

전기영동 사진

1     2    3     4     5    6     7     8     9    10    11

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<몽크앵무 2수 (8/1)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	몽크앵무 1	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	몽크앵무 1	분변	음성
3	ABV-L gene	511 bp	몽크앵무 1	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	몽크앵무 1	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	몽크앵무 1	분변	양성
7	BDV-M gene	327 bp	몽크앵무 2	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	몽크앵무 2	분변	양성
9	ABV-L gene	511 bp	몽크앵무 2	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	몽크앵무 2	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	몽크앵무 2	분변	양성

전기영동 사진

1     2     3     4     5    6      7     8     9    10    11   12

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6, 12 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<< 검은머리장수앵무(8/4)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	검은머리장수앵무	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	검은머리장수앵무	분변	음성
3	ABV-L gene	511 bp	검은머리장수앵무	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	검은머리장수앵무	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	검은머리장수앵무	분변	음성

전기영동 사진

1     2     3     4     5    6

lane 1, 2, 3, 4, 5  : 시료

lane 6             : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<왕관비둘기 2수 (8/4)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
2	BDV-M gene	327 bp	왕관비둘기 1	분변	음성
3	BDV-N gene	366 bp	왕관비둘기 1	분변	음성
4	ABV-L gene	511 bp	왕관비둘기 1	분변	음성
5	ABV-M gene	337 bp	왕관비둘기 1	분변	음성
6	ABV-N gene	373 bp	왕관비둘기 1	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	왕관비둘기 2	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	왕관비둘기 2	분변	음성
9	ABV-L gene	511 bp	왕관비둘기 2	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	왕관비둘기 2	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	왕관비둘기 2	분변	음성

전기영동 사진

1    2     3     4     5     6      7     8     9    10    11   12

lane 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 1, 12 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<구관조 2수 (8/5)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
2	BDV-M gene	327 bp	구관조 1	분변	음성
3	BDV-N gene	366 bp	구관조 1	분변	음성
4	ABV-L gene	511 bp	구관조 1	분변	음성
5	ABV-M gene	337 bp	구관조 1	분변	음성
6	ABV-N gene	373 bp	구관조 1	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	구관조 2	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	구관조 2	분변	음성
9	ABV-L gene	511 bp	구관조 2	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	구관조 2	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	구관조 2	분변	음성

전기영동 사진

1     2     3     4     5    6      7     8     9    10    11   12

lane  2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 1, 12 : 100 bp ladder

시료세부내역

및 결과

<<토코투칸 2수 (8/8)>>

lane 번호	사용 Primer	양성밴드	동물명	시료(조직)	결과
1	BDV-M gene	327 bp	토코투칸 1	분변	음성
2	BDV-N gene	366 bp	토코투칸 1	분변	음성
3	ABV-L gene	511 bp	토코투칸 1	분변	음성
4	ABV-M gene	337 bp	토코투칸 1	분변	음성
5	ABV-N gene	373 bp	토코투칸 1	분변	음성
7	BDV-M gene	327 bp	토코투칸 2	분변	음성
8	BDV-N gene	366 bp	토코투칸 2	분변	양성
9	ABV-L gene	511 bp	토코투칸 2	분변	음성
10	ABV-M gene	337 bp	토코투칸 2	분변	음성
11	ABV-N gene	373 bp	토코투칸 2	분변	양성

전기영동 사진

1     2     3     4     5    6      7     8     9    10    11   12

lane 1, 2, 3, 4, 5, 7, 8, 9, 10, 11 : 시료

lane 6, 12 : 100 bp ladder