문서번호	신물질분석과-377
결재일자	2016.3.15.
공개여부	대시민공개
방침번호

			시 민
주무관		신물질분석과장	수질분석부장
권학선		안재찬	03/15 김복순
협조

기초 실험장비 ‘마이크로피펫’

방문 세미나 개최 결과보고

2016. 3.

서울특별시 수질분석부

(신물질분석과)

기초 실험장비 ‘마이크로피펫’

방문 세미나 개최 결과보고

미량오염물질, 미생물 등 수질분석에 이용하고 있는 기초 실험장비인 피펫의 올바른 사용법, 유지관리 등에 관한 세미나를 실시하고, 그 결과를 보고 드림

□ 추진근거

○ 264회 시의회 건의사항, 「세미나 실시 등 숙련된 연구인력 확보를 위해 노력하기 바람」

○ 기초 실험장비 ‘방문 세미나’ 개최 계획  (신물질분석과-335, ’16.3.9.)

□ 세미나 개요

○ 일   시 : ’16.3.11.(금)  09:30~11:30

○ 장   소 : 아리수 탐구교실(본관 3층)

○ 초청강사 : Eppendorf Korea, 정은실 부장 (무료 세미나)

○ 참가인원 : 연구원 - 신물질분석과장 등 17명

아리수정수센터 - 분석 담당자 7명

○ 내   용 : 전자피펫의 종류, 올바른 사용법, 유지관리 방법 등

○ 세미나 일정

구분	시 간	제 목	진 행 자
방문 세미나	09:30~10:00	등 록	권학선 연구사
	10:00~10:02	인사말(수질분석부장)
	10:02~11:00	피펫팅의 기본원리	Eppendorf Korea 정은실 부장
		피펫팅의 영향인자 - 피펫팅 결과값을 좌우하는 영향인자 - 다양한 피펫팅 방법
		Calibration의 중요성
	11:00~11:30	오염 방지방법 피펫의 유지/보수 방법

□ 세미나 사진

< 이론 강의 >	< 어 신기하네~>
<나도 한번 해 보자...>	< 유지관리는 요렇게 ~ >

□ 세미나 요약

○ 피펫 종류 : Air-Cushion방식, Positive displcement 방식

①  Air-Cushion Pippette : 스프링과 피펫팁 시료 사이에 존재하는 공기를 매질로 이용하여 용매를 이동하는 방식

- 단점

· 온도·습도에 따라 공기의 팽창률 영향을 많이 받음.

· 알콜 등 휘발성이 강한 시료(또는 용매)는 공기를 밀어내기 때문에

피펫팅 후 Dripping 현상(시료가 똑똑 떨어지는 것)이 발생하기 쉬움

- 피펫팅 방식 2 가지 : Forward pippeting, Reverse pippeting

· Forward pippeting : 일반적 방식 (점성이 약한 시료)

⇒ 피스톤을 1st 위치에서 시료 로딩후에  2nd 위치까지 눌러 시료를 완전 배출

▷ 영향인자

㉠ 사전 적시기(Pre-wetting) : 본 시료 피펫팅 전에 시료로 피펫팅 3~4회 실시

→ 재현성 향상

㉡ 피펫팅 각도 : 45도 이하 기울임 보다 90도 방향으로 피펫팅 → 재현성 향상

㉢ 피펫 팁의 시료에 적시는 깊이 : 최소화 유지 (압력차 감소 목적)

㉣ 휘발성 높은 시료 : Forward pippeting 시 휘발에 따른 공기층 내 압력 증가로 시료의 dripping 현상 발생

⇒ 해결방안 : Pre-wetting 약 10회 실시하여 공기를 휘발성분으로 대체시 시료의 dripping 현상이 제거 됨

⇒ 시료마다 휘발성이 상이함

· Reverse pippeting : 점성이 강한 시료

⇒ 피스톤을 2nd 위치에까지 서서히 시료 로딩후에 피스톤을 1st 위치까지만 서서히 눌러 시료를 배출 (일부가 팁 내부에 존재)

⇒ 점성이 강한 시료를 Forward pippeting시 문제점 :

시료가 전량 배출되지 못하고 잔량 발생

▷ 영향인자 :  피펫팅 속도 → 느리게  시료 로딩 및 배출

②  Positive displacement : 스프링과 피펫팁의 시료가 직접 접촉하는 디스펜서 방식

- 특징 : 점도가 높은 시료에 사용

휘발성 높은 시료에 사용

거품 발생 시료에 사용

정확도 높음(Air-cushion 방식과 유사)

[ 3가지 타입의 피펫팅 방식 비교 ]

<고 점성 용매>	< 휘발성이 높은 용매 >

○ 올바른 피펫팅 방법

- 정확한 시료 부피를 취하기 위해서는 부피 가변형(adjustable-volumn) 피펫보다는 부피 고정형(fixed-volumn) 이 보다 정확하나, 비용측면에서 비효율적임

- 부피 가변형 피펫의 경우 사용가능 최대 부피의 피펫을 사용하는 것이 정확도 향상

예) 시료 100 μL 취할 시 100~1,000 μL 피펫 사용시 정확도 :  ± 3.0 %

시료 100 μL 취할 시 10~100 μL 피펫 사용시 정확도     :  ± 0.8 %

- 구동방식에 따른 특징

	Manual (수동) Type	Electronic (전자) Type
피스톤 구동방식	사용자 직접 구동	모터 구동 방식
피펫팅 속도	사용자 컨디션에 따라 변동 가능성 존재	일정, 피펫팅 속도는 변경 가능
정확도	낮음	높음
조작에 필요한 힘	많은 힘이 필요	적은 힘이 필요
기능	피펫팅만 가능	다양한 기능 (피펫팅, 멀티 디스펜서, 혼합 기능 등)

○ 마이크로피펫 캘리브레이션

- 캘리브레이션을 위해 엄격한 환경조건 및 고난도의 높은 숙련도 요구됨

- 따라서, 제조사에 캘브레이션 의뢰하는 것이 비용, 효율 등 측면에서 유리

※ 제조사의 교정 성적서 요청시 : 개당 5,000~10,000원 비용 소요

※ 교정 성적서 미요청시 : 제조사 정책에 따라 상이 (Eppendorf는 무료)

(단, KOLAS 시험용 교정 피펫은 KOLAS 교정기관에 별도 의뢰)

□ 행정사항

○ 필요에 따라 부서별로 보유 마이크로피펫 제조사에 교정 실시

※ Eppendorf,  Gilson, Nichiryo, Thermo Scientific, Cole-Parmer 등

□ 기대효과

○ 기초 실험장비에 대한 정확한 이해로 분석의 정확성 및 재현성 향상

붙임 : 1. 교육자료       1부

2. 참석자 서명부  1부. 끝.