문서번호	동물연구실-2641
결재일자	2014.9.3.
공개여부	대시민공개
방침번호

				시 민
주무관	동물연구실장	동물원장
유미현	어경연	09/03 노정래
협 조
	동물기획과장		김태원
	동물복지과장		이달주
	주무관		윤정상

전국동물원

침팬지 아종확인 유전자분석 연구계획

서 울 대 공 원

(동물연구실)

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전국동물원

침팬지 아종확인 유전자분석 연구계획

전국동물원 침팬지의 유전자분석을 통해 국내 사육 관리중인 침팬지 전수에 대한 아종확인을 실시하고, 이를 바탕으로 가계도 및 혈통도를 작성 관리하여 지방동물원 및 국외 동물원과의 동물교환을 통해 침팬지의 유전적 다양성을 보존고자 함

1. 추진배경

□ 추진목적

○ 침팬지의 과학적 개체관리 및 교배계획 수립을 위해 2009년 전국동물원 침팬지에 대한

유전자분석을 실시함

○ 서울동물원, 에버랜드등 5개 동물원 17개체의 유전자분석 완료

○ 대전, 광주, 전주동물원등 3개 동물원 5개체의 샘플이 확보되지 않아 분석에 제외됨

○ 지방동물원 및 국외동물원과의 동물교환 및 반입·반출을 위해 2009년 미분석된 개체에 대한

추가분석을 시도하고자 하며

○ 전국동물원 침팬지 전수에 대한 아종확인결과를 바탕으로 가계도 및 혈통도 작성을 위해

본 실험을 수행하고자 함

□ 추진대상

○ 대 상 종 : 침팬지(Chimpanzee, Pan troglodytes)

○ 아종현황 :

Pan troglodytes
P. t. verus	Western or masked chimpanzee
P. t. schweinfurthii	East African or long-haired chimpanzee
P. t. vellerosus	Nigeria chimpanzee
P. t. troglodytes	Central African or black-faced chimpanzee

2. 분포현황

□ 2009년 전국동물원 침팬지 분포 및 분석 현황

동물원	침팬지			연구진행상황	비고
	♂	♀	합계
서울동물원	2	2	4	분석완료
어린이대공원	1	1	2	분석완료
에버랜드	4	4	8	분석완료
전주동물원	1	1	2	샘플 미확보
광주우치동물원	1		1	샘플 미확보
대구달성공원		1	1	분석완료
대전동물원	1	1	2	샘플 미확보
애나스토리	1	1	2	분석완료
총합계	11	11	22

□ 전국동물원 침팬지 변동현황 및 금번 분석대상

동물원	침팬지			2009년분석이후 변동사항	분석 대상 개체
	♂	♀	합계
서울동물원	2	4	6	번식분 2수가 추가되었지만 부모 개체에 대한 분석이 2009년 완료 되었으므로 번식분에 대한 추가분석 필요없음	없음
어린이대공원	1		1	2010년 암컷 폐사	없음
에버랜드	3	4	7	2014년 수컷 1수 대구달성공원으로 반출	없음
대구달성공원	1	1	2	2009년 암컷 분석완료 2014년 반입된 수컷은 에버랜드에서 분석 완료된 개체임	없음
애나스토리				2009년 분석개체 2수 폐사	없음
광주우치동물원	1		1	없음	1수
대전동물원	1	1	2	없음	2수
전주동물원	1	1	2	없음	2수
총합계	10	11	21		5수

3. 분석방법

3.1 분석대상 : 5개체

□ 광주우치동물원                        1개체(M)

□ 대전동물원                           2개체 (M, F)

□ 전주동물원                           2개체 (M, F)

3.2 비교개체 : 32개체

□ NCBI 산하 GenBank에서 검색한 염기서열 :  32개체

․ P. t. troglodytes                      12개체

․ P. t. schweinfurthii                   10개체

․ P. t. vellerosus                        5개체

․ P. t. verus                             5개체

3.3 DNA 추출 및 PCR 수행

DNA 추출은 DNeasy Tissue Kit을 사용하였으며, 미토콘드리아 DNA control region을 PCR 증폭 후, Hyper-variable region I(HVI) 500bp를 D88 및 D441 primer를 이용하여 ABI PRISM 310 genetic analyzer로 염기서열을 결정함.

3.4 자료분석

연구에 사용된 개체들의 염기서열(500bp)은 CLUSTAL W를 이용하여 multiple alignment한 후, Mega 3 program을 이용하여 Tamura-Nei model에 따라 개체간의 genetic distance를 추정하고 Neighbor-Joining 방법에 의해 phylogenetic tree를 작성함.

4. 2009년 분석결과

4.1 염기서열분석 결과

□ control region HVI 부위의 500bp 염기서열 분석

□ phylogenetic tree를 작성한 결과 그림 1과 같이 네 개(P. t. troglodytes, schweinfurthii , vellerosus, verus)의 그룹으로 뚜렷하게 구분되었으며,

□ 분석대상 17수중 4수(서울동물원 갑순이, 에버랜드 M2, 어린이대공원 M, 대구)는 P. t. troglodytes그룹에 속하였고, 나머지 13수는 P. t. verus그룹에 속하였음.

4.2 각 동물원별 아종확인 결과

□ 서울동물원 : 4수 중 2개의 아종 확인

․ 갑돌, 용용, 주디 : P. t. verus로 확인

․ 갑순 : P. t. troglodytes로 확인

※ 모계유전에 따라 갑순의 아종은 P. t. troglodytes로 확인되었지만, 부(父)인 갑돌과 모            (母)인 애순이 사이에서 태어난 개체로 P. t. verus과 P. t. troglodytes의 Hybrid 개체로 추정

□ 에버랜드 : 8수중 2개의 아종 확인

․ M1, M3~M4, F1~F4 : P. t. verus로 확인

․ M2 : P. t. troglodytes로 확인

□ 어린이동물원 : 2수중 2개의 아종 확인

․ F : P. t. verus로 확인

․ M : P. t. troglodytes로 확인

※ 어린이동물원 M은 서울동물원과 교환개체로 갑순이와 동일한 부모사이에서 태어난 개체로,              P. t. verus과 P. t. troglodytes의 Hybrid 개체로 추정

□ 애니스토리 : 2수중 1개의 아종 확인

․ TOTO, ZUPI : P. t. verus로 확인

□ 대구달성공원 : 1수중 1개의 아종 확인

․ Daegu : P. t. troglodytes로 확인

※ 2009년 전국동물원 아종확인 결과표

기관명 (개체수)	개체명	성별	아종확인	특이사항
서울동물원 (4)	갑돌	Male	P.t.verus
	갑순	Female	부 : 갑돌(P.t.verus) 모 : 애순(P.t.troglodytes)
	주디	Female	P.t.verus
	용용	Male	P.t.verus
에버랜드 (8)	M1	Male	P.t.verus	번식분의 경우 두 아종간 잡종 가능성이 있으므로 자력 확인이 필요함
	M2	Male	P.t.troglodytes
	M3	Male	P.t.verus
	M4	Male	P.t.verus
	F1	Female	P.t.verus
	F2	Female	P.t.verus
	F3	Female	P.t.verus
	F4	Female	P.t.verus
어린이대공원 (2)	M	Male	부 : 갑돌(P.t.verus) 모 : 애순(P.t.troglodytes)	서울동물원 교환분 똘똘이로 추정됨
	F	Female	P.t.verus
애니스토리 (2)	토토	Male	P.t.verus
	주피	Female	P.t.verus	서울대공원으로 ‘주디’와 동일개체로 추정
대구달성공원 (1)	대구	Female	P.t.troglodytes
총 17수

끝.