문서번호	동물연구실-2070
결재일자	2014.7.7.
공개여부	대시민공개
방침번호

				시 민
주무관	동물연구실장	동물원장
유미현	어경연	07/07 노정래
협 조
	주무관		이명희
	주무관		윤정상

멸종위기 종 금개구리의 증식 및 복원을 위한

금개구리 유전적 다양성 연구계획

서 울 대 공 원

(동물연구실)

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검토항목	검 토 여 부 (■ 표시)
시민참여 고려사항	●	시민	:	유 □	(		)		무 ■
	●	이해당사자	:	유 □	(		)		무 ■
	●	전문가	:	유 □	(		)		무 ■
	●	옴 브 즈 만	:	유 □	(		)		무 ■
법령및기타 고려사항	●	법령규정	:	교통 □ 환경 □ 재해 □
				기타 □	(	예시 : 일상감사 대상여부 등	)		무 ■
	●	기타사항	:	고용효과 □ 노동인지 □ 균형인지 □
				홍보 □ 취약계층 □ 성인지 □ 빗물순환 □
				장애인 □ 디자인 □ 갈등발생 가능성 □
				유지관리 비용 □ 바른 우리말 □				무 ■
타자원의 활용	●	중앙부처	:	유 □	(		)		무 ■
	●	민간단체	:	유 □	(		)		무 ■
	●	기업	:	유 □	(		)		무 ■
관 계 기 관 및 단체 협의	●	관계기관	:	유 □	(		)		무 ■
	●	민간단체	:	유 □	(		)		무 ■
	●	시산하기관	:	유 □	(		)		무 ■
언론홍보 계획	●	홍보계획	:	보도자료 □ 기자설명회 □ 현장설명회 □ 기획보도 □
				기고문 □ 기타 □ ( ) 없음 ■

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사전 검토항목 작성안내

시민참여 고려사항	●	시민, 이해당사자, 전문가, 옴브즈만(시민 모니터링단) 등 참여 고려 여부 - 청책워크숍, 마실, 타운홀 미팅, 자문회의 개최 등
법령및기타 고려사항	●	법령규정	:	교통, 환경, 재해 영향평가, 일상감사 대상사업 등 관련법령 검토 여부
	●	기타	:	▸고용효과 : 사업 추진에 따른 고용유발 효과 고려 유무
				▸노동인지 : 일자리 안정성, 임금․노동 조건 고려 유무
				▸균형인지 : 지역균형발전을 위한 사항 고려 유무
				▸홍 보 : 홍보대상 및 매체, 핵심 메시지 고려 유무
				▸취약계층 : 정책 수혜대상으로 취약계층 고려 유무
				▸성 인 지 : 성주류화 관점 반영 고려 유무
				▸장 애 인 : 정책 수혜대상으로 장애인 고려 유무
				▸디 자 인 : 디자인 관점 반영 고려 유무
				▸갈등발생 가능성 : 발생 가능한 갈등에 대한 사전 고려 유무
				▸유지관리 비용 : 정책실행 후 유지관리 비용 고려 유무
				▸바른 우리말 : 무분별한 외래어, 행정순화어 교정 등 고려
				▸빗물순환 : 빗물관리, 저영향개발, 불투수면 억제 등 고려
타자원의 활용	●	중앙부처(국토해양부, 경찰 등), 민간단체(시민단체, 협회 등), 기업 등의 인적 ․ 물적 자원 활용 여부
관 계 기 관 및 단체 협의	●	관계기관(국토해양부, 타 지자체, 25개 자치구 및 이에 소속된 기관 등), 민간단체(시민단체, 협회 등), 시 산하기관(투자․출연 기관) 협의 유무
언론홍보계획	●	보도자료 제공, 기자설명회 개최 등 언론홍보 계획 유무 및 홍보방법

멸종위기 종 금개구리의 증식 및 복원을 위한

금개구리 유전적 다양성 연구계획

IUCN 및 환경부 지정 멸종위기 종인 금개구리의 증식 및 복원 연구를 위해 야외에서 채집되어 사육 관리중인 번식장 금개구리 10수의 유전자분석을 통해 개체군의 유전적 다양성 및 안정성을 평가하여 추후 금개구리 복원연구의 기초자료로 활용하고자 함

Ⅰ		연 구 개 요

▢ 금개구리 분류체계

계[Kingdum]	문[Phylum]		강[class]	목[order]	과[family]
ANIMALIA	CHORDATA		AMPHIBIA	ANURA	RANIDAE
학명[Scientific Name]:		Rana plancyi chosenica
영명[Common Name(s)]:		Pond Frog, Seoul frog
이명[Synonym(s)]:		·Pelophylax chosenica ·Rana chosenica ·Rana nigromaculata subspecies chosenica ·Rana plancyi subspecies chosenica
분류학적 특징:		참개구리(R. nigromaculata)와 형태 및 서식지가 비슷하여 참개구리의 아종으로 분류되기도 하였으나, 등 면 융기선의 차이로 Shannon(1956)에 의하여 중국금개구리(R. plancyi)의 아종인 R. plancyi chosenica로 기재됨

▢ 금개구리 지역적 분포도

·금개구리는 과거 제주도를 포함한 남서부 지역 대부분의 논이나 연못에 흔히 관찰되었으나, 최근에는 경기도와 충청도에서만 확인되는등 급격한 감소 추세에 있음 ·2005년 환경부 멸종위기야생동·식물 Ⅱ급 종으로 지정 ·세계자연보전연맹(IUCN)의 멸종취약종으로 분류

▢ 금개구리 국내 연구 현황

·금개구리 기초생태 조사 및 복원에 대한 기초조사 이상철(2003) ·금개구리와 참개구리와의 종간 격리 양서영(1998) ·금개구리 유전적 다양성 연구 민미숙(2008) ·IUCN 멸종위기종인 금개구리의 증식 및 복원 기술개발 강원대학교(2009) ·금개구리 개체군의 생존분석 정석환(2009)

Ⅱ		연 구 방 법

▢ 금개구리 개체 현황

- 10수(암수미정)

- 14년 6월 17일 경기도 시흥시 연꽃테마파크에서 채집

▢ 금개구리 유전적 다양성 연구 방법

(가) 시료 채취

- 비침습적방법을 이용한 샘플 채취(면봉을 이용한 구강상피세포 채취등)

- 채취된 샘플을 분석시까지 –20℃상태로 냉동 보관

(나) DNA 추출 및 PCR 반응

- DNeasy Tissue Kit을 이용하여 Genomic DNA를 추출

- 미토콘드리아 DNA control region, cytochrome b, 12S rRNA 부위 증폭을

위한 특이적인 primers 제작

- PCR수행 및 PCR product 전기영동

- PCR Purification Kit(Qiagen)을 이용하여 정제

- 정제된 PCR산물을 ABI 310 Genetic Analyzer를 이용하여 염기서열 결정

(다) Data분석

- CLustal W를 이용한 Multiple alignment 수행

- 비교 대상종 선정 : 미국유전자은행(NCBI)의 참개구리와 중국산 금개구리

염기서열, 기 분석된 국내산 금개구리의 지역별(평택, 파

주, 안산, 청원등) 염기서열

- MEGA4 Program을 이용하여 Genetic distance와 Phylogenetic tree 분석

- 번식장 개체군의 haplotype 확인

- 개체군별 유전적 구성 및 근연관계 추정

Ⅲ		기 대 효 과

▢ 멸종위기에 처해 있는 한반도의 금개구리처럼 서식지 고립화와 개체수가 적은

개체군은 근친퇴화와 유전적 다양성의 감소, 개체수의 불안정성 등으로 결국

멸종에 이르게 됨

▢ 멸종위기종이나 유전적 다양성이 부족한 개체군을 보전하기 위해서는 외부

집단으로부터의 개체 도입이 필요하게 되는데, 도입될 개체 선정을 위해서는

해당 개체군의 정확한 분류학적 위치와 유전적 정보의 확립이 필요함

▢ 따라서 금개구리 복원에 사용될 개체 선정을 위해 분류학적 위치를 명확히

결정하여야 하며 유전적 정보가 밝혀져야 함

▢ 금개구리의 분포현황과 현재 채집된 지역 개체들에 대한 유전자 분석 결과를

토태로 유전적 다양성이 높으며 고유한 유전자 구성을 이루고 있는 지역을

선정하여 복원연구의 기초자료로 활용

Ⅳ		향 후 계 획

▢ 추후 타지역(세종, 파주등)에서 채집되는 개체에 대해서도 유전자분석을

통하여 기 분석된 개체와의 유전적 구성의 차이 및 근연관계를 확인하여

증식에 활용하고 체계적이고 과학적인 개체관리 및 복원연구에 활용

끝.